致病菌检测

　　致病菌(Pathogenic bacteria ) 能引起疾病的微生物称为病原微生物或致病菌。病原微生物包括细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体、衣原体、支原体、真菌及放线菌等。一般所说的致病菌指的是病原微生物中的细菌。细菌的致病性与其毒力、侵入数量及侵入门户有关。虽然绝大多数细菌是无害甚至有益的，但是相当大一部分可以致病。条件致病菌只在特定条件下致病，如有伤口可以允许细菌进入血液，或者免疫力降低时。 例如，金黄色葡萄球菌和链球菌也是正常菌群，常可以存在于体表皮肤，鼻腔而不引起疾病，但可以潜在引起皮肤感染，肺炎(pneumonia)，脑膜炎(meningitis)败血症(sepsis)\

　　菌片的制备程序

　　1 滴染法染菌时，先用浊度计测定的菌悬液浓度，调至含菌量为1～5×108cfu/ml将经灭菌的载体片平铺于无菌平皿内，菌液滴加量每片为10μl。用10μl移液器 接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后，染菌载体可置37℃温箱内烤干(约20min～30min)，或置室温下自然阴干后再使用。

　　2 每个菌片的染菌量，即回收菌数，按活菌培养计数所得结果，应为 5×105 cfu/片～5×106 cfu/片。

　　3 配制菌悬液和制备菌片时，保持环境的洁净和安静，严格按无菌要求操作，以防污染杂菌，影响随后杀菌试验的结果。

　　培养基

　　1、 高氏一号培养基 ： K2HPO4﹒3H2O 0.5g，可溶性淀粉 20g，KNO4 1g, MgSO4﹒7H2O 0.5g， FeSO4﹒7H2O 0.1g，NaCl 0.5g， H2O 1000ml。

　　2、 种子培养基：葡萄糖 5g，淀粉 1.5g，酵母粉 2.5g，CaCl2 0.1g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g，MgSO4﹒7H2O 0.5g，NaCl

　　0.5g，FeSO4﹒7H2O 0.01g，H2O 1000ml，pH 7.2-7.4

　　3、 发酵培养基：黄豆饼粉 10.0g，淀粉30g，葡萄糖 50g，酵母粉5g，玉米浆 15g，CaCl2 3.0g，H2O 1000ml，pH 7.0

　　4、 LB培养基(液体)：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，H2O 1000ml，pH 7.0

　　5、 LB培养基(固体)：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，琼脂 16g，H2O 1000ml，pH 7.0