三羧酸循环（TCA循环）代谢物检测

　　三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle)是需氧生物体内普遍存在的代谢途径，分布在线粒体。因为在这个循环中几个主要的中间代谢物是含有三个羧基的有机酸，所以称为三羧酸循环，又称为柠檬酸循环或者是TCA循环;也以发现者Hans Adolf Krebs命名为Krebs循环。三羧酸循环是三大营养素(糖类、脂类、氨基酸)的*终代谢通路，又是糖类、脂类、氨基酸代谢联系的枢纽。

　　检测方法

　　百泰派克检测平台采用Agilent 1260 Infinity型高效液相色谱仪对样品进行分离，DAD检测器鉴定，该方法可以高效、精准的检测三羧酸循环代谢物的含量变化。目前可检测的三羧酸循环代谢物包括柠檬酸、丙酮酸和琥珀酸酸等。对于常见三羧酸循环代谢物或以上三羧酸循环代谢的同类物质，可配合标样进行检测，对于稀有的三羧酸循环代谢物，如提供标准样品，可提供定制检测。对于在三羧酸循环过程中的酶类物质，结合相应的试剂盒采用生化法检测。

　　图1添加柠檬酸对代谢产物琥珀酸的影响

　　样品制备

　　三羧酸循环代谢物提取方法(此部分涉及到公司的核心工艺，以下仅为常规提取工艺)

　　1)     取10 mL左右的样品;

　　2)     5℃，12000rpm离心10 min;

　　3)     取上清;

　　4)     0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC检测。